玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)ELISA檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱： 玉米赤霉烯酮ELISA檢測試劑盒

產(chǎn)品概述：玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又稱F-2毒素，是玉米赤霉菌的代謝產(chǎn)物，具有雌激素樣作用，具有較強的生殖毒性和致畸作用，可引起動物發(fā)生雌激素亢進癥，導致動物不孕或流產(chǎn)，對家禽、豬、牛和羊的影響較大，給畜牧業(yè)帶來很大的經(jīng)濟損失。

適用范圍

玉米赤霉烯酮ELISA檢測試劑盒可定性、定量檢測玉米、大米、麥類、啤酒等樣本中的玉米赤霉烯酮殘留量。

檢測限：0.2 ppb

試驗原理

采用競爭ELISA，在微孔板上預包被玉米赤霉烯酮抗原，加入樣本（或玉米赤霉烯酮標準品溶液）及辣根過氧化物酶標記的玉米赤霉烯酮抗體。樣本或標準品溶液中的玉米赤霉烯酮與預包被在板孔上的玉米赤霉烯酮抗原競爭結(jié)合辣根過氧化物酶標記的玉米赤霉烯酮抗體。與樣本或標準品溶液中的玉米赤霉烯酮結(jié)合的酶標抗體在洗滌時被除去。再加入TMB顯色，讀取吸光值。樣本的吸光值與其所含殘留物玉米赤霉烯酮抗原的含量成負相關。對照標準曲線，即可得出相應殘留物玉米赤霉烯酮的含量。

試劑配制

1、樣品稀釋液：用去離子水將濃縮樣品稀釋液按1:9體積比進行稀釋（1份濃縮樣品稀釋液+9份去離子水）。

2、洗滌工作液：用去離子水將濃縮洗滌液按1:9體積比進行稀釋（1份濃縮洗滌液+9份去離子水）。

3、 50％甲醇水：取無水甲醇，用去離子水以1:1體積比例稀釋（1份無水甲醇＋1份水）。

4、40％甲醇水：取無水甲醇，用去離子水以1:1體積比例稀釋（4份無水甲醇＋6份水）

操作步驟

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于2～8℃。不要冷凍。

3、洗滌工作液在使用前也需回溫。

4、將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

5、加標準品/樣本50ml到對應的微孔中，加入酶標物50ml/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境中反應15min。

6、小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液300ml/孔，充分洗滌5次，每次間隔30s，用吸水紙拍干。

7、加入顯色液100ml/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境反應15min。

8、加入終止液50ml/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處測定每孔OD值。

注意事項:

1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會導致所有標準的OD值偏低。

2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。

3、每加一種試劑前需將其搖勻。

4、反應終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。

5、不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6、儲存條件

  保存于2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

7、試劑變質(zhì)的跡象

發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應當棄之。0標準的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質(zhì)。

8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時間為20～30min即可。若顏色較淺，可延長反應時間到35min（或更長），但不得超過40min。反之，則減短反應時間。

9、*反應溫度為25℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

試劑盒組成

1、96孔酶標板×1塊

2、標準液×6瓶：（1ml/瓶）

0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb, 8.1ppb

3、酶標物 1瓶  …………………………………………… 6ml

4、顯色液1瓶    ………………………………………  12ml

5、終止液      ………………………………………6ml

6、濃縮洗滌液 （10×） ………………………………… 40ml

7、濃縮樣品稀釋液（10×） ……………………………… 40ml

貯藏條件及保存期

  貯藏條件：保存試劑盒于2～8℃。

      保存期：有效期為12個月。

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